胎膜早破
【摘要】 目的 探讨解脲支原体(uu)感染与早产及胎膜早破的相关性。方法 采用分离培养法，分别对46例胎膜早破和7例早产患者(试验组)以及32例正常妊娠(对照组)妇女的宫颈分泌物、胎膜和脐带进行uu检测；对部分试验组和对照组的胎盘组织进行电镜观察，并与阳性培养物负染电镜观察结果相比较。结果 试验组宫颈分泌物、胎膜和脐带中uu检出率均为73.6%(39/53)，对照组宫颈、胎膜和脐带中的uu检出率分别为40.6%(13/32)和15.6%(5/32)，两组比较，差异有极显著性(p＜0.01， p＜0.001);uu阳性患者围产期死亡、死胎和低体重儿的发病率为34.1%(15/44)，明显高于胎膜uu检出阴性的患者(7.3%，3/41，p＜0.01)。电镜观察显示，从胎膜早破者胎盘组织的合体滋养层细胞的核膜周围及胶原纤维中见大量增殖的uu颗粒，并与负染电镜下所见的uu颗粒相一致。而在正常胎盘组织中未见到相同颗粒。结论 uu感染是部分早产、低体重儿和胎膜早破的原因；滋养层细胞内uu的增殖，可诱发相应的细胞结构的改变，以致干扰胎儿的正常发育。
ureaplasma urealyticum infection and premature delivery or premature
rupture of the membrane
zhou liping， zhou jie， bao qiyu
wenzhou medical college， wenzhou325003
【abstract】 objective to evaluate the relationships between ureaplasma urealyticum (uu) infection and premature delivery or premature rupture of the membrane (prom).methods the cervical swabs， fetal membrane and umbilical cord from 46 cases of prom， 7 cases of premature delivery (study group)， and 32 normal pregnancies (control group) were cultutred for uu. some of these placenta tissues were examined under electron microscopy， and compared with the purified uu. results the detective rates of uu were both 73.6%(39/53) in the cervix and fetal membrane of the study group， and to compare with the control group (40.6%， 13/32 and 15.6%， 5/32 respectivety)， significant differences were shown (p＜0.01， p＜0.001). the prevalence rate of perinatal mortality， stillbirth and low birth weight in uu-positive cases (34.1%， 15/44) was significantly higher than that in uu-negative cases (7.3%， 3/41， p＜0.01). electron microscopy demonstrated that large amount of small multiplicated uu particles deposited around the nuclear membrane of the cytotrophoblasts and in the collagen fibers from the placenta of prom， and its shape was in consistent with that of the purified uu. in contrast， no uu particles was seen in the normal control group.conclusion the results show that uu is responsible for some cases of premature delivery， low birth weight and prom. the multiplication of uu within the trophoblasts may disrupt cell structure which could interfere the normal fetal development.
【key words】 ureaplasma infections labor， premature fetal membranes， premature rupturemicroscopy， electron
解脲支原体(ureaplasma urealyticum， uu)是近年来最被关注的与不良妊娠结局相关的支原体，如习惯性流产、早产、胎膜早破(premature rutpure of the membrane， prom)， 低体重儿及新生儿围产期感染都与此有关［1-5］。uu能干扰妊娠期胎儿正常发育，确切的机理尚不清楚［1，2］。我们采用分离培养法对prom、早产及正常妊娠的胎膜、脐带及其母亲宫颈分泌物进行uu检测。并对部分胎盘组织进行超薄切片和电镜观察，旨在探讨uu与不良妊娠的相关性及其临床意义。
资料与方法
一、病例来源及分组
1.试验组：53例，随机选自1998年2～7月间，前来我院附属第二医院产科住院分娩的产妇，其中符合prom诊断［6］ 46例(平均年龄27.2岁，孕周36～40周)，早产7例(平均年龄为22.2岁，孕周28～35周)。
2.对照组：32例，为同期在温州医学院附属第二医院产科分娩的正常孕妇(平均年龄为25.2岁，孕周38～41周)。试验组和对照组均进行常规妇科和产科检查，未发现生殖系统明显异常。
二、方法
1.标本的采集与处理：分娩前分别常规取产妇宫颈分泌物，接种于uu液体培养基。分娩后取离胎膜破口5 cm以上的胎膜组织约2 cm×2 cm×2 cm，取脐带长约0.5 cm，分别置于uu液体培养基。同时取脐带长约0.5 cm，置基础肉汤6～8小时增菌后，接种于血平板进行常规细菌学检测。另取部分胎盘组织约0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm，浸泡于电镜固定液，以备电镜观察。
2.uu的分离培养与鉴定：按本实验室操作常规进行［7］。
3.脐带常规细菌学鉴定：按操作常规进行。
4.负染电镜观察：uu阳性培养物经12 000 r/min 4℃离心60分钟，沉淀物用ph 7.2的10 mmol/l的磷酸盐缓冲液(pbs)洗3次，菌体用4%醋酸铀(ph 4.2)作负染，在h-600电镜下观察。
5.超薄切片电镜观察：将所取的胎膜组织置于2.5% pbs的戊二醛固定液中作前固定，1%锇酸作后固定，epon 812环氧树脂包埋液包埋，lkb-2088超薄切片(5～8 μm)，h-600电镜下观察。
结果
一、试验组和对照组uu检出率比较
试验组从宫颈分泌物和胎膜及脐带中检出uu 39例，占73.6%。从对照组，从宫颈分泌物中检出uu 13例，占40.6%，胎膜和脐带中检出uu 5例，占15.6%，两组比较，差异有极显著性(p＜0.05， p＜0.001)。
在uu阳性患者中，低体重儿13例(＜2 500 g)，死胎(双胎，1 350 g和1 335 g)、新生儿死亡各1例，总发生率为34.1%(15/44)，明显高于胎膜或脐带uu检出阴性者(7.3%，3/41，p＜0.01)。 见表1。
表1 两组孕妇及新生儿uu检出率比较
组弊芾???狈置谖锾ツず推甏?粜岳??俜直?%)阳性例数百分比(%)试验组 prom4633
71.7
33
71.7 早产7685.7685.7对照组321340.6515.6
二、常规细菌学培养
两组中仅1例胎膜早破胎儿脐带中检出乙型溶血性链球菌，且产妇产后体温升高(39℃)，经相应抗生素治疗后，感染症状缓解。
三、负染电镜观察
胎膜早破uu检出阳性培养物经负染电镜观察，见成串排列球形uu颗粒。
四、绒毛超微结构观察
试验组分别取自3例胎膜早破患者，其中2例分娩低体重儿(体重分别为1 390 g和1 440 g)，1例为分娩后新生儿当天死亡的胎盘组织，另1例为自然流产的胎盘组织。并与正常胎盘组织相比较。试验组的合体滋养细胞的核膜周围及胶原纤维层中见大量成簇排列的球形uu颗粒，以及胶原纤维空泡内增殖的子代uu颗粒。滋养细胞胞浆内存在大量囊性扩张的粗面内质网，线粒体肿胀或消失，整个胞浆呈空泡样变性，胞核染色质周边聚积。而对照组未见增殖的uu颗粒及相应的病理变化。
讨论
一、uu与早产、低体重儿及prom的关系
本研究发现，在uu的检出中，试验组明显高于对照组，两组比较，差异有显著性。这不仅提示uu与胎膜早破及早产相关，且试验组从胎膜或脐带中uu检出率(73.6%， 39/53)明显高于对照组(15.6%， 5/32， p＜0.001)。此结果与国外的报道相吻合［2，4］。有人认为，这也许与某些毒力强的血清型uu更易上行至宫腔导致上生殖道感染，而另一些血清型uu则易在下生殖道定居有关［2，4］。本结果还提示，试验组低体重儿、死胎及围产期早期死亡的总发生率(34.1%，15/44)，明显高于uu阴性患者(7.3%，p＜0.01)。以上结果均提示早产、低体重儿和胎膜早破等不良妊娠结局与uu的宫内感染相关。
二、uu在滋养细胞内增殖及其超微结构改变
应用电子显微镜进行细胞超微结构水平观察发现，uu颗粒及其相关结构的病理性改变是证实uu感染最直接证据之一。本研究结果不仅显示从自然流产胎盘组织的绒毛滋养层细胞中发现典型空泡内增殖的uu颗粒，而且从妊娠晚期(＞36周)胎膜早破胎盘组织的合体滋养细胞中也发现胞核周围有许多成簇的uu颗粒，提示uu能在妊娠的全过程定位于滋养细胞内并增殖。并且发现存在相应的细胞结构的病理性改变，主要是胞浆呈空泡样变性，胞核染色质周边积聚，且线粒体肿胀甚至消失等细胞结构改变。这些细胞超微结构的改变可能与uu产生的多种酶类有关，尤其是卵磷酯酶具有溶解线粒体膜的功能。由于细胞的氧化和磷酸化作用主要是在线粒体内进行，线粒体的功能直接影响到细胞的能量代谢和胎盘的血液供给。因此，导致胎盘的能量供给不足，供血减少，最终使胎儿宫内缺血缺氧。
综上所述，我们认为，由于uu的细胞内感染，随着胎盘细胞形态学的改变，线粒体功能的退化，胎盘的物质交换与转运能力下降，从而影响胎儿摄取氧和营养物质的正常功能，导致胎儿的正常发育受到影响，临床表现为习惯性流产，低体重儿或早产。总之，有关uu与上述不良妊娠结局相关的确切机理尚不清楚，有待进一步研究与阐明。
志谢 本研究在电镜阅片中，得到温州医学院病理学教研室朱金昌教授的指导，谨此志谢
本课题受浙江省教委科研基金资助
参考文献
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7 周丽萍，陈柏坤，杨介钻，等.温州地区解脲支原体感染调查.中国人兽共患病杂志，1998，14：72-75.